使用液相色譜柱時(shí)應當注意哪些事項

　　液相色譜柱的技術(shù)主要包括填料技術(shù)和裝柱技術(shù)，填料的好壞對色譜柱分離性能和選擇性有決定性影響。裝柱技術(shù)沒(méi)有想象中那么簡(jiǎn)單，不同固定相、不同粒徑、不同柱管內徑和長(cháng)度，裝柱工藝都有所不同，要裝出緊密、穩定、均一的柱床，需要經(jīng)驗積累。

　　一般情況下，正相反相柱應該都能反沖，只有兩端篩板孔徑不對稱(chēng)的柱子不能反沖，不過(guò)目前這樣的柱子已經(jīng)比較少見(jiàn)了。反沖是為了把柱頭的污染物沖洗掉，反沖后還是正著(zhù)用比較好，以免柱子的兩頭都被污染。建議正向使用，反向沖洗。

　　使用該色譜柱時(shí)應當注意以下事項：

　　避免過(guò)柱壓：雖然液相色譜柱能耐受的壓力可達6000psi,但過(guò)及過(guò)大的壓力變化均會(huì )縮短色譜柱的壽命,避免的方法是：柱壓過(guò)時(shí),盡可能采用較小的流速,以不過(guò)柱允許壓力的一半為宜。當流速較大時(shí),應采取流速梯度的辦法使流速分步到位。使用手動(dòng)進(jìn)樣閥時(shí)，進(jìn)樣閥的切換要盡可能的快。否則過(guò)20%的壓力沖擊會(huì )快使柱報廢。當使用多柱聯(lián)用時(shí)，柱切換要避免在壓下進(jìn)行。

　　當流動(dòng)相中含有緩沖鹽時(shí)，則過(guò)濾是必要的，當緩沖溶液放置一段時(shí)間(視環(huán)境溫度不同而異，夏季一般不過(guò)48h，冬季一般不過(guò)一周)后，在使用前還應重過(guò)濾。

　　過(guò)濾流動(dòng)相和樣品：流動(dòng)相通常由水或緩沖溶液與有機溶劑混合而成，經(jīng)過(guò)色譜柱的流動(dòng)相均應過(guò)濾，但在實(shí)際操作上應視具體情況而有所區別:當有機溶劑用色譜純級，水用石英亞沸水或其它純水時(shí)，在能確保水和有機溶劑的質(zhì)量且沒(méi)有受到污染時(shí)，過(guò)濾并無(wú)更多實(shí)際意義。

　　需要加裝保護柱：保護柱的作用是過(guò)濾掉來(lái)自流動(dòng)相和樣品的化學(xué)雜質(zhì)的同時(shí)，也可以除去流動(dòng)相和樣品中的不溶物。盡管現在的色譜儀在流動(dòng)相吸入口、進(jìn)樣閥后部以及在色譜柱的兩端都裝有1、2μm等不同孔徑的濾器,但濾器只能除去不溶性顆粒而不能除去化學(xué)污染，因此加裝保護柱是必要的，是在分析中藥、中成藥等復雜混合物和生物樣品時(shí)更是保護分析柱*的措施。