柱前衍生被測組分通過(guò)衍生化反應，轉化為衍生化產(chǎn)物，然后再經(jīng)過(guò)色譜柱進(jìn)行分離。液相色譜法中柱前衍生的目的是:通過(guò)衍生化反應，使原來(lái)不能直接被檢測的組分轉化為能被所用檢測器檢測的物質(zhì);使被測組分與衍生化試劑有選擇地參加反應，而與樣品中的其他組分分離;改變被測組分在色譜柱的出峰次序，使之更有利于分離。柱前衍生的點(diǎn)是可以不必嚴格限制衍生化反應條件，可以允許較長(cháng)的反應時(shí)間及使用各種形式的反應器。其缺點(diǎn)是當一個(gè)復雜組分樣品經(jīng)過(guò)衍生化反應后，有可能產(chǎn)生多種衍生化產(chǎn)物，給色譜分離帶來(lái)困難。

    柱后衍生利用衍生反應使被測物與相應的試劑反應，以改變其物理或化學(xué)性質(zhì)，使其被檢測到。例如將發(fā)色基團或熒光基團鍵合到樣品中去，多放大檢測靈敏度，柱后衍生系統開(kāi)創(chuàng )了柱后衍生系統性能、價(jià)格及外形的標準。

    HPLC柱前衍生和柱后衍生的相關(guān)問(wèn)題？1）為什么要衍生？2）衍生化的分類(lèi)？3）進(jìn)行衍生，適用的化合物有哪些？4）進(jìn)行衍生化的要求有哪些？5）柱前衍生和柱后衍生的缺點(diǎn)？

    答：色譜技術(shù)中的化學(xué)衍生法系指在色譜過(guò)程中用的化學(xué)試劑（一般稱(chēng)為衍生化試劑或標記試劑）使樣品成分轉變相應的衍生物之后進(jìn)行分離檢測或進(jìn)行檢測的方法。目的為：

    1．將紫外—可見(jiàn)吸收功能基團引入被檢測對象或將其轉變?yōu)闊晒庋苌?，以提檢測靈敏度；

    2．提對分析樣品的分離和選擇性。

    從是否與HPLC系統聯(lián)機的角度，化學(xué)衍生法分為在線(xiàn)（on line）與離線(xiàn)（Off line）兩種。從發(fā)生衍生化的場(chǎng)合，分為柱前衍生法（pre-columnderivatization）與柱后衍生法（post-columnderivatization）兩種。

    目前，在HPLC中，以離線(xiàn)的柱前衍生法（簡(jiǎn)稱(chēng)柱前衍生法）與在線(xiàn)的柱后衍生法（簡(jiǎn)稱(chēng)柱后衍生法）使用居多。