液相色譜儀是進(jìn)行定量分析，雜質(zhì)檢查等分析工作中主要的儀器，色譜柱是液相色譜儀的核心部件。在這里，介紹一下液相色譜柱使用中的注意事項及使用心得。
　　柱頭類(lèi)型和不銹鋼毛細管接頭的匹配
　　色譜柱是消耗品，不是儀器原配的情況多，如果接頭和柱頭深度匹配將會(huì )產(chǎn)生漏液或者死體積過(guò)大的現象。接頭比柱頭深度長(cháng)，不易擰緊而漏液；接頭比柱頭深度短，柱頭內留有空隙而產(chǎn)生死體積，使譜帶展寬和峰拖尾。
　　溶劑的匹配轉換
　　色譜柱內保存溶劑和儀器系統內存留溶劑，如果和流動(dòng)相不匹配，使用前需進(jìn)行轉換。是流動(dòng)村j含緩沖鹽時(shí)，如保存溶劑足純有機相或有機相比例，直接將柱接人使用，會(huì )導致緩沖鹽在柱內結晶析出，造成柱頭堵塞。建議儀器和色譜柱經(jīng)常使用，用10％的有機溶劑保持即可。
　　流動(dòng)相及待測樣品的過(guò)濾
　　日常分析工作中，我們使用的流動(dòng)栩和待測樣品應用0．45pm濾膜過(guò)濾后再連接或注入到色譜儀上。對于有機相比例的流動(dòng)栩可以一起過(guò)濾出來(lái)備用，但是有機相比例小的流動(dòng)相一定要現用現濾，分析結束時(shí)一定要用10％的有機溶劑沖洗管路及色譜柱，為有機相少的流動(dòng)相容易滋生細菌，造成色譜柱堵寒，影響色譜柱性能。
　　色譜柱分析時(shí)應進(jìn)行平衡和老化
　　進(jìn)行的方法是運行幾次完整的分析程序(包括進(jìn)樣)，直到觀(guān)察到峰形、保留時(shí)間和峰面積穩定為止。對某些特定的待測物，如分子量大于1000的，閃擴散速度慢，老化時(shí)間相應要長(cháng)，可采取大濃度進(jìn)樣或在同一個(gè)洗脫周期內連續進(jìn)樣多針的方式加快老化。
　　pH使用范圍
　　一般認為硅膠基質(zhì)柱子的pH使用范足2—8，如果選用的是品質(zhì)硅膠，加上密度鍵合和雙封尾，使pH耐受范同大提到lO。注射用頭孢拉定流動(dòng)村1pH值為8，對色譜柱傷害，需要選擇pH值耐受性的色譜柱。
　　峰形異常
　　峰形對稱(chēng)性的劣對峰面積和分離度有的影響，從而影響分析結果的性。檢查樣品足否過(guò)載，由于樣品過(guò)載引起的峰形后拖不能通過(guò)改變色譜條件消除。如果發(fā)現過(guò)載，需降低進(jìn)樣量(包括進(jìn)樣體積或濃度)，進(jìn)樣量越小，峰形越好，例子如頭孢尼西鈉的測定。其次，硅醇基次級保留引起部分峰拖尾。這種情況發(fā)生，選擇密鍵合和*的雙蜂尾工藝的色譜柱能改善峰形。另外，溶解樣品的溶劑洗脫能力比流動(dòng)相會(huì )發(fā)生峰前延，所以樣品好選用流動(dòng)相溶解。
　　色譜柱保存
　　短期保存(隔夜或隔周末)用所用的流動(dòng)相(不含緩沖鹽)保存為佳，以盡量減少下次使用的平衡時(shí)間。一般只建議在長(cháng)期保存反相柱的時(shí)候用純醇或乙腈，使用80％左右有機相保存也屬好的選擇，且足以避免長(cháng)菌。烈建議在柱身上貼標簽標明保存溶劑。離子交換柱和水性凝膠柱等適合保存在水溶液中的色譜柱，可加0．05％*溶液防止K菌。正相柱無(wú)論是短期還足長(cháng)期，都推薦保存住所用流動(dòng)相巾。