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反相色譜柱怎么使用和維護?
點(diǎn)擊次數:1795 發(fā)布時(shí)間:2021-11-30
反相色譜柱是迄今在液相色譜中應用的技術(shù),主要是因為它適用于分析絕大多數的非性物質(zhì)和多的可離子化的及離子化合物。做好反相色譜柱使用及維護工作,可可以延長(cháng)色譜柱使用壽命。
1、在條件允許情況下,在使用前盡量對色譜柱按照說(shuō)明書(shū)方法進(jìn)行柱效測試。以確保色譜柱的正常。
2、硅膠基質(zhì)色譜柱使用溫度應低于60℃。
3、樣品:盡量將樣品溶解在流動(dòng)相或性相近的溶劑中。如果使用梯度洗脫,則需要將樣品溶解在初始流動(dòng)相或性相近的溶劑中。樣品溶液不應含有任何顆粒物,盡量使用0.5μm或更小粒徑的濾膜過(guò)濾。樣品溶液如果使用溶劑(例如,流動(dòng)相為水,樣品溶劑為甲醇),為達到較好峰形,需要降低進(jìn)樣量
4、流動(dòng)相:流動(dòng)相,是含有緩沖鹽的流動(dòng)相,盡量當日實(shí)驗當日配制;如果使用了前日配制的流動(dòng)相,請確保流動(dòng)相pH值沒(méi)有變化,并確保流動(dòng)相沒(méi)有長(cháng)菌。 流動(dòng)相的pH值取決于您的應用和色譜柱填料類(lèi)型。我們建議在的色譜柱盡量在pH2~8范圍內使用。請盡量避免在常規流動(dòng)相中使用比例的水(>95%)作為流動(dòng)相,可能會(huì )造成保留時(shí)間的不穩定或者色譜柱鍵合相的損害。
5、色譜柱平衡:在進(jìn)行分析之前,請使用至少20倍柱體積的流動(dòng)相沖洗色譜柱,以使色譜柱達到平衡。
6、色譜柱保護:對于“臟”的樣品以及組分未知的樣品,請盡量使用在線(xiàn)濾器或保護柱,如果可能,使用SPE小柱對樣品進(jìn)行前處理是較好的選擇。