*，做HPLC分析時(shí)梯度系統可以在縮短分析時(shí)間的同時(shí)而不影響樣品的分離，但是簡(jiǎn)便的同時(shí)也伴隨著(zhù)多種多樣的問(wèn)題，就筆者個(gè)人總結，常見(jiàn)的問(wèn)題有三點(diǎn)：

    （1）兩相混合后產(chǎn)生氣泡

    緩沖鹽溶液與純甲醇走梯度產(chǎn)生的氣泡圖，對此我們公司通常的解決方法是使用“反壓調節器”使紫外檢測池有一定的壓力，阻止氣泡形成。其次通常我們不建議使用純的有機相如純甲醇，純乙腈作流動(dòng)相。

    （2）梯度基線(xiàn)漂移問(wèn)題

    此問(wèn)題一般發(fā)生在梯度線(xiàn)形變化的時(shí)候，而在低波長(cháng)下基本不可避免。因為色譜常用的甲醇和乙腈在低波長(cháng)（如210nm）下是有吸收的，如果基線(xiàn)隨著(zhù)有機相不斷增多而上漂或者隨著(zhù)有機相的不斷減少而下漂，這不僅是正?，F象，還反映了系統的靈敏性和性。所以這個(gè)問(wèn)題無(wú)法消除，只能通過(guò)選擇更的有機溶劑來(lái)降低基線(xiàn)漂移的程度，如乙腈的工業(yè)污染物為丙酮（有的紫外吸收），選擇更的乙腈可以地降低梯度漂移的程度。

    （3）梯度鬼峰

    這個(gè)問(wèn)題可以一分為二，梯度鬼峰有偶然情況和必然情況兩種。

    偶然情況為流動(dòng)相未經(jīng)良好脫氣，溶解氧能與某些有機溶劑形成有紫外吸收的絡(luò )合物，而出現的吸收，此種情況沒(méi)有重復性，可以通過(guò)良好的流動(dòng)相脫氣而避免。

    可能還有些問(wèn)題這里未能總結，得通過(guò)化學(xué)工作者不斷去發(fā)現和總結，遇到問(wèn)題解決問(wèn)題是化學(xué)工作者的基本工作，實(shí)事求是是化學(xué)工作的基本要求。

    必然情況即隨著(zhù)梯度運行形成一些莫名其妙的峰，并且有*的重復性，不可避免，一般發(fā)生在梯度有大的變化的時(shí)候。遇到這樣的情況不要擔心，做一個(gè)梯度空白對照，只要梯度鬼峰不影響樣品的出峰即可。