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色譜柱有沒(méi)有壽命過(guò)短究竟是為什么
點(diǎn)擊次數:1077 發(fā)布時(shí)間:2019-06-11
您在日常的實(shí)驗過(guò)程中用的色譜柱有沒(méi)有壽命過(guò)短的問(wèn)題?不但實(shí)驗成本攀升,實(shí)驗效果都沒(méi)法。我們今天就為您解答有關(guān)色譜柱使用壽命的相關(guān)問(wèn)題,助您的柱子“益壽延年”!
為什么檢測該項目使用不同品牌的色譜柱,壽命均在100針左右?
1)可能的原因是樣品組分吸附在色譜柱的前段??赡苁怯捎跇悠吩诹鲃?dòng)相中的溶解度低而沉淀出來(lái)的,也有可能是吸附,或是樣品本身與填料表面發(fā)生微弱的不可預知的化學(xué)反應。樣品溶液本身的pH值在色譜柱的耐受臨界值附近,而且進(jìn)樣體積較大(內徑4.6mm,上樣體積在50ul以上)對柱頭端的填料影響比較大,通常這樣的情況伴隨柱壓升。
解決方法:選擇合適的樣品前處理技術(shù),去除掉保留物質(zhì)。使用保護柱,盡量選擇與分析柱同種填料,同種鍵合方法的保護柱。如果使用不同品牌的填料、裝填工藝的保護柱,在分離能力和保護分析柱方面可能得不到較好的效果。也不要使用更大粒徑的保護柱,更大粒徑或者裝填較差的保護柱會(huì )因為它的峰展寬作用而導致分離能力下降。
2)鍵合相脫落變性。色譜條件多方作用導致壽命短,這是目前的色譜技術(shù)不能解決的,一般情況下小基團鍵合相更容易被水解而脫落。流動(dòng)相中鹽濃度越,越容易引起水解。這種情況下,就只能重開(kāi)發(fā)色譜條件。
為什么該品牌的色譜柱一直好,就這一支壽命異常短?
確定一下使用頻率、沖洗頻率、流動(dòng)相的更換頻率、流動(dòng)相的試劑品牌、純度等是否和之前一樣,如果有更換,那壽命有差異是正?,F象。如果都與之前相當,那需要檢查這支色譜柱是否受過(guò)劇烈震蕩,比如:不小心摔過(guò),或者運輸過(guò)程中受過(guò)劇烈震蕩,建議與廠(chǎng)家的技術(shù)人員溝通。
為什么使用該品牌的支色譜柱用于方法建立時(shí)壽命長(cháng),方法建立后,開(kāi)始進(jìn)行方法驗證時(shí),卻覺(jué)得壽命短?
這種情況的發(fā)生,的原因是,前期建立方法時(shí),并不是連續做項目,而是不停地更換流動(dòng)相。這就意味著(zhù)色譜柱的沖洗頻率比較,而更換的流動(dòng)相的清潔度也是比較好的。建立方法的時(shí)候難連續進(jìn)樣多次,有時(shí)候甚至一周才做一次項目,這樣就會(huì )產(chǎn)生支柱子使用時(shí)間更久的錯覺(jué)。而方法建立后,做方法驗證,流動(dòng)相固定下來(lái),就會(huì )一次性配置較大體積的流動(dòng)相,這樣流動(dòng)相較易變質(zhì),有時(shí)肉眼不能直接分辨。而且會(huì )連續多次過(guò)夜進(jìn)樣,這樣對色譜柱的沖洗也不是及時(shí)。這些都是可能導致色譜柱壽命變短的因素。