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色譜柱的使用與維護是十分重要的
點(diǎn)擊次數：1641 發(fā)布時(shí)間：2017-12-12
在日常分離分析工作中，色譜柱的正確使用和維護十分重要，色譜柱使用是否得當，直接影響色譜柱的壽命，在色譜操作過(guò)程中，需要注意下列問(wèn)題，以維護色譜柱。
1、柱子在裝卸、更換時(shí)，動(dòng)作要輕，接頭擰緊要適度。必須防止較的機械振動(dòng)，以免柱床產(chǎn)生空隙。
2、如果儀器用來(lái)做常規分析，樣品種類(lèi)有限，但分析次數多，則不妨為每一類(lèi)常規分析配置一根柱，這樣有助于延長(cháng)柱子的壽命。
3、避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動(dòng)。溫度的突然變化或者使色譜柱從處掉下都會(huì )影響柱內的填充狀況;柱壓的突然升或降低也會(huì )沖動(dòng)柱內填料，因此在調節流速時(shí)應該緩慢進(jìn)行，在閥進(jìn)樣時(shí)閥的轉動(dòng)不能過(guò)緩。
4、應逐漸改變溶劑的組成，是反相色譜中，不應直接從有機溶劑改變?yōu)椴渴撬?，反之亦然?nbsp;
5、如使用柱溫控制裝置時(shí)，應注意在通人流動(dòng)相后才能升溫。
6、一般說(shuō)來(lái)色譜柱不能反沖，只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時(shí)，才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì)。否則反沖會(huì )迅速降低柱效。
7、選擇使用適宜的流動(dòng)相，以避免固定相被破壞。有時(shí)可以在進(jìn)樣器前面連接一個(gè)預柱，分析柱是鍵合硅膠時(shí)，預柱為硅膠，可使流動(dòng)相在進(jìn)入分析柱之前預被硅膠“飽和”，避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。
8、避免將基質(zhì)復雜的樣品尤其是生物樣品直接注人柱內，需要對樣品進(jìn)行預處理或者在進(jìn)樣器和色譜柱之間連接一個(gè)保護柱。保護柱一般是填有相似固定相的短柱。保護柱可以而且應該經(jīng)常更換。
9、 經(jīng)常用溶劑沖洗色譜柱，清除保留在柱內的雜質(zhì)。在進(jìn)行清洗時(shí)，對流路系統中流動(dòng)相的置換應以相混溶的溶劑逐漸過(guò)渡，每種流動(dòng)相的體積應是柱體積的20倍左右，即常規分析需要50-75mL。
10、保存色譜柱時(shí)應將柱內充滿(mǎn)乙腈或甲醇，柱接頭要擰緊，防止溶劑揮發(fā)干燥。禁止將緩沖溶液留在柱內靜置過(guò)夜或更長(cháng)時(shí)間。
11、色譜柱使用過(guò)程中，如果壓力升，一種可能是燒結濾片被堵塞，這時(shí)應更換濾片或將其取出進(jìn)行清洗;另一種可能是大分子進(jìn)人柱內，使柱頭被污染;如果柱效降低或色譜峰變形，則可能柱頭出現塌陷，死體積增大。
12、在完成分離分析工作之后，不應立即停機，需及時(shí)對色譜分析系統進(jìn)行沖洗，一般0.5h以上，以除去色譜柱內的雜質(zhì)。
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