使用凝膠色譜系統的一些注意事項：

　　溶劑準備：使用HPLC純溶劑，如有必要，進(jìn)行過(guò)濾。溶劑的相溶性，避免使用對不銹鋼有腐蝕性的溶劑。

　　溶劑脫氣：聲脫氣。

　　樣品準備：過(guò)濾樣品，確保樣品中不含固體顆粒，用流動(dòng)相溶解樣品。

　　色譜柱的保護：

　　(1)防止氣體進(jìn)入色譜柱。凝膠柱是不允許氣泡進(jìn)入的，否則將會(huì )使柱效降低甚至形成微小的難以驅除的氣室。因此，為了防止氣泡進(jìn)入色譜柱，一定要使用經(jīng)過(guò)脫氣的流動(dòng)相，并且要嚴格按照下列步驟來(lái)安裝色譜柱：

　　a.拆卸下色譜柱入口處的密封螺絲，觀(guān)察是否有溶劑滲出；

　　b.如有溶劑滲出，即可將色譜柱接到管路上，以避免氣泡的進(jìn)入；

　　c.如無(wú)溶劑滲出時(shí)，表明色譜柱的此端已經(jīng)進(jìn)去空氣了，此時(shí)，可將色譜柱的出口端接到進(jìn)樣閥上，以流動(dòng)相來(lái)反方向沖洗色譜柱，以便將柱內的空氣排除。以0.2ml/min的小流量來(lái)沖色譜柱，如果溶劑的流速太快或者是壓力突然的上升都將會(huì )導致柱性能的降低；

　　d.如果流出的溶劑里不含有氣泡，說(shuō)明柱內的氣體已經(jīng)被排出了，再將色譜柱以正確的方向接好，這樣氣泡就進(jìn)不到色譜柱里面了。

　　(2)色譜柱的清洗。為了不使被測物質(zhì)和雜質(zhì)停留在色譜柱中，在每次的樣品分析工作完成之后，都應及時(shí)地清洗色譜柱。首要用對被測樣品洗脫能力的溶劑來(lái)洗脫色譜柱，以分析工作中常用的反相色譜分析法為例，因其流出的物質(zhì)是性大的物質(zhì)，此時(shí)應用100%的甲醇或使用異丙純、四氫呋喃等性稍弱的溶劑將吸附在柱內的性小的物質(zhì)洗脫下來(lái)，洗脫液的用量一般為柱體積的20倍即可。如果流動(dòng)相是緩沖溶液，則應用蒸餾水來(lái)沖洗色譜柱，以沖掉柱內的鹽，然后再用合適的溶劑來(lái)沖洗。

　　凝膠濾過(guò)色譜法(Gel Filtration Chromatography)中所使用的凝膠柱常用緩沖溶液做流動(dòng)相，用完之后當然要用蒸餾水來(lái)沖洗。如果是連續操作，可以將緩沖溶液置于柱內過(guò)夜，但是維持小流速(＜0.5ml/min)以防止緩沖鹽的析出，如果流動(dòng)相中含有鹵化物，即使是停一夜，也必須要用蒸餾水將色譜柱沖洗干凈，以防止它們對柱體的腐蝕。

　　(3)色譜柱的存放。如果色譜柱暫時(shí)不用，存放時(shí)要注意以下幾點(diǎn)：

　　a.幾天之內的短期放置，凝膠柱則用蒸餾水來(lái)沖洗，再把色譜柱的兩頭用密封螺絲密封好即可。

　　b.如果色譜柱長(cháng)期不用，僅用上述方法來(lái)處理就不行了，這時(shí)應使用色譜柱使用說(shuō)明書(shū)中所指明的溶劑來(lái)充滿(mǎn)色譜柱，凝膠柱則不能用水了，因柱內如果有微生物的生長(cháng)則會(huì )使柱效降低，此時(shí)應用0.05%的NaNs水溶液(防腐劑)來(lái)沖洗色譜柱，再將色譜柱封嚴。色譜柱長(cháng)期放置時(shí)，一定要將色譜柱的兩端封嚴，以防止由于溶劑揮發(fā)而造成的柱填料干縮現象，因這可導致柱效的嚴重降低。

　　c.色譜柱應貯存在室溫下，如果放置于0℃以下的環(huán)境里，柱內就會(huì )結冰，這也將導致柱效的降低。

　　(4)不要溫使用。

　　(5)不要壓沖洗柱子

　　對儀器的維護和保養進(jìn)行記錄。